안녕하세요 Cell Viabilty를 측정하는 여러 실험들 중 Cell titer glo에 대해 설명드리려고 해요. 기존 Cell Viabilty assay로 유명한것은 MTT Assay이지만 MTT assay는 여러 가지 한계점이 있습니다. 대표적으로 실험이 단순하지않아서 좀 번거롭습니다. 그리고 감도가 매우 낮고 MTT 시약에 의한 독성이 확인되었습니다. MTT assay를 대체하고자 CellTiter-Glo assay를 가져왔습니다. CellTiter Glo Assay 를 CTG assay라고 부르겠습니다. CTG assay는 세포 배양중에 세포에 존재하는 ATP를 측정해서 cell viabilty를 측정하는 제품입니다. 시약에 독성도 없고 실험자가 처리한 물질에 의한 변화 무를 제공해주어서 결과를..

LUHMES cell을 분화시켜보려고 합니다. Lund human mescencephalic (LUHMES) cell은 human embryonic neuronal percursor cell입니다. 이 셀을 분화시켜서 dopaminergic neuron marker들을 확인하려고 합니다. 일단 결과적으로는 Dopamine transporter와 Tyrosine hydroxylase 인자들을 western blot assay를 통해서 확인했습니다. 또한 CellTiter glo assay를 이용해서 cell viabilty도 검증하였습니다. Celltiter glo assay는 세포 배양 중에 세포에 있는 ATP를 측정하여 세포 viability를 확인할 수 있습니다. 시약 자체 독성도 없고 아주 정확한 ..

Primary Hippocampal Neuron Culture 1탄에 이어서 2탄입니다! 실험 시작전 준비사항부터 설명드릴게요. 크게보면 실험준비 - Dissection -Immunochemistry - Confocal imagin - Analysis Coverslips 준비 Autoclave된 Beaker를 dry oven으로 완전히 말린다 Beaker에 18 mm Coverslip넣고 1 N HCl 약 150mL 넣어준다. 상온에서 rocker speed 100으로 6시간 이상 shaking함. 주의사항 : 산성 보호 장갑 착용하고 fume hood에서 진행 다음날, 반이상 물을 먼저 채우고 폐수통에 cover slip을 버리지않게 최대한 버림. 약 200mL의 3’DW로 5번 정도 씻어준다. 주의사..